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                                                                   产品名称Q?/strong>d泌体胎牛血清套装(乌拉圭)
 
                                                                   英文名: Source&Exosome-Depleted Fetal Bovine Serum
 
                                                                   血源地Q?/strong> 乌拉圭(UruguayQ?/span>
 
                                                                   产品货号Q?/strong> CMT201.03
 
                                                                   l分货号Q?Source FBS    SV30087.03
 
                                                                                    Exosome-Depleted FBS    CMS201.03
 
                                                                   产品规格Q?/strong> 500mLQSource FBSQ?50mLQExosome-Depleted FBSQ?/font>
 
                                                                   供应商: 赛澳细胞技术(北京Q有限公?/font>
 

注:d泌体胎牛血清套装,是由Source FBSQ未l去外泌体处理的原胎牛血清)和Exosome-Depleted FBSQ去外泌体处理的胎牛血清)l成Q两个组分胎牛血清的来源与批ơ均一_能够保证整个实验q程l胞状态的E_?/font>

 

Why are you need this Exosome-Depleted FBS?

胎牛血清以其能为细胞生长提供重要的营养及生长物质,而成为细胞完全培d中必不可的d成分。然而,普通胎牛血清中因含有大量的牛源外泌体,会对体外培养的组l或l胞分泌的外泌体研究造成q扰Q媄响科学实验结果?/font>

因此我们在ȝ大量外泌体相x献ƈҎ各种血清外泌体去除Ҏ后,优化Z一U较好的去除胎牛血清外泌体的处理方法。普通胎牛血清经该方法处理后Q不仅能够去除血清中95%以上的牛源外泌体?5%以上的牛源miRNAsQ同时保持了良好的细胞生长及l持功能?/font>

How about this Exosome-Depleted FBSQ?/strong>

去除外泌体血清每一个批ơ都是经q严格的外泌体相x和l胞培养试Q确保每一Ҏ产品的质量稳定可靠。我们的d泌体胎牛血清具有如下特点:

√去掉FBS?5%以上的牛源外泌体Q?/strong>

√无菌、无支原体、无外源病毒污染Q?/strong>

√无M其他成分dQ?/strong>

√每一Ҏ血清品均l过严格的细胞培L试!

√{为外泌体相关的组l及l胞培养研制Q?/strong>

TipsQ?/font>

Ҏ我们的研I结果,在培L细胞时Q可直接使用Exosome-Depleted FBS单品Q也可同时做Source FBS的对比,二者培L果相当?/font>

在培养脓壁细胞时Qؓ可能多地收集细胞释攄外泌体,方便U研人员研究Q我们徏议可以先使用Source FBS细胞培养至Ҏ生长?单层l胞Q再更换为含10%Exosome-Depleted FBS的细胞完全培dq行l持培养Q到一定时间后攉培养上清中的l胞外泌体进行相关研I。若直接使用d泌体的血清进行培养,需适当增大l胞接种度?/font>

Supporting Data

以下是关于我们的d泌体胎牛血清的部分结果:

A.SDS-PAGE血清电泛_外泌体特征蛋白CD63的Western Blot结?/strong>

Panel aQ?/font>

通过SDS-PAGE凝胶甉|分析Q由上图可以发现Q处理前4个批ơ的源血清与处理后(l优化的离处理方式Q的4个批ơ的d泌体血清均可见清晰的蛋白电x带(源血清中的蛋白含量略高于处理后的外泌体血清)Q说明该处理Ҏ保留了血清中大部分的营养蛋白成分?/font>

Panel bQ?/font>

Western Blot不同FBS中外泌体特征性蛋白CD63的含量:实验室中x对照ؓ普通FBSl超d理后攉的外泌体羃涌Ӏ通过普通超dl优化的离处理Q?个不同批ơ)l果ҎQ普通超M能完全去除FBS中的外泌体,我们?个不同批ơ的d泌体血清中均检不到CD63Q显CZ卓越的外泌体去除效果?/p>

B.FBS外泌体miRNA的检?/strong>

我们采用Trizol法和实际合法QQIAGENQExoRNeasy Serum/Plasma Starter KitQ分别提取Source FBS、Exosome-Depleted FBS和经qPEG沉淀法处理的FBS中的RNAQ将所有的RNAq行逆{录然后用qPCR的方法检外泌体特征性miRNAQ包括miR21、miR23a、miR34c、miR122、miR150c?/p>

结果显C,x对照miR34c和miR150c有扩增,miR23a和miR122 Ct值均大于33QmiR21未检到Ct倹{通过与阴性对照组比较QExosome-Depleted FBSh不到miRNAs。显CExosome-Depleted FBS卓越的miRNA去除效果。另有文献报道,l适当的超d理即可除去FBS?5%以上的miRNA?/p>

qPCR扩增曲线及分析曲U如下所C:

C.l胞培养?/strong>

我们分别采用Source FBS和Exosome-Depleted FBS培养293T、Beas2B和THP-1{细胞,Ҏ两种血清的差异?/p>

在细胞培养过E中我们发现Q对于脓壁细?93T、Beas2BQSource FBS和Exosome-Depleted FBS均能使细胞正常脓壁生长,但当l胞接种密度低时Q随着培养旉廉QExosome-Depleted FBSl稍昄胞增D能力略显不I?93Tl胞表现较明显。实验过E中发现Beas2Bl胞能在d泌体FBS中生长良好,但细胞Ş态较在Source FBS中略昑ַ异?/p>

文献报道QExosome-Depleted FBS存在刺激l胞生长的不的情况Q因此徏议,对于贴壁l胞的培养,先用Source FBS细胞培养至Ҏ生长?单层l胞Q再更换为含10%Exosome-Depleted FBS的细胞完全培L。对于比较容易培ȝl胞Q也可直接用去外泌体胎牛血清进行培养,但须注意的是在直接用外泌体的血清进行脓壁细胞培LQ需要适当增大l胞接种密度?/p>

实验中,我们试了单层细胞的l持情况Q正常情况下Q用含Exosome-Depleted FBS的完全培L可已长成单层的l胞l持正常形态至?2时以上?/p>

悬Ql胞THP-1的测试结果显C,Source FBS和Exosome-Depleted FBSl胞增殖势一_均在同一天达到增D高峰。当辑ֈl胞增殖高峰ӞSource FBS的细胞数量略比Exosome-Depleted FBS高,但二者ƈ无显著差异?/p>

且在l胞辑ֈ峰值前Q下图中 Day3Q,Source FBS l和Exosome-Depleted FBSl的l胞zȝ均在98%以上Q当l胞q入衰退期以后,Exosome-Depleted FBSl显CZ更高的细胞活率,说明Exosome-Depleted FBS昄了更好的l胞l持效果Q其l胞l持能力优于Source FBS l?/p>

 

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